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    大鼠Elisa試劑盒樣品處理及保存方法

    更新時間:2022-09-26      瀏覽次數:846
      大鼠Elisa試劑盒是通過酶聯免疫吸附反應進行實驗來檢測特定物質的試劑盒,試劑盒中會有不同濃度的標準樣品,在酶標條中通過固相的抗原或抗體,酶標記的抗原或抗體,酶作用的底物反應可形成標準曲線,從而進行試驗樣品的測定。
      大鼠Elisa試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:
      1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
      2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
      3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
      4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
      5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
      大鼠Elisa試劑盒操作步驟:
      1.通過計算并確定一次性實驗所需的板條數,取出所需板條放置在框架內,暫時用不到板條請放回鋁箔袋密封,保存于4℃。
      2.建議設置本底較正孔,即空白孔,設置方法為該孔只加TMB顯色液和中止液。每次實驗均需做標準品對照并畫出標準曲線。
      3.分別將標本或不同濃度標準品(100u1/孔)加入相應孔中,用封板膠紙封住反應孔,室溫孵育120分鐘。對于血清或血漿標本,請加入50u1樣本分析緩沖液后加50u1標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。
      4.洗板5次,且置厚吸水紙上拍干。
      5.加入生物素化抗體工作液(100u1/孔)。用封板膠紙封住反應孔,室溫孵育60分鐘。
      6.洗板5次,且置厚吸水紙上拍干。
      7.加入酶結合物工作液(100u1/孔)。用封板膠紙封住反應孔,避光室溫孵育20分鐘。
      8.洗板5次,且置厚吸水紙上拍干。
      9.加入顯色劑TMB100u1/孔,避光室溫孵育20分鐘。
      10.加入終止液50u1/孔,混勻后即刻測量0D450值。
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